《联邦调查局》顾名思义就是讲述美国著名的执法部门FBI，而该剧背景在纽约的办公室。
该剧以联邦调查局(FBI)纽约市 外地办公室刑事部门的内部运作为中心。这支精英部队在重大案件中发挥了他们所有的才能、才智和技术专长，以确保纽约和国家的安全。特工玛吉·贝尔出生于一个多代执法家庭，她对与她一起工作的人和她所保护的人做出了深深的承诺。她的搭档是特工奥马尔·阿多姆“O.A. ” Zidan，皇后区西点军校毕业生[10]，曾为DEA卧底两年 在被联邦调查局精心挑选之前。负责监督他们的是特工达纳·莫西尔（DanaMosier），他在巨大的压力下行动并拥有不可否认的指挥权。该团队还包括主管助理特工朱巴尔·瓦伦丁（JubalValentine），他是办公室的神经中枢，能够轻松地与上级和下属建立联系和互动，这使他成为主要的激励者。克里斯汀·查扎尔(KristenChazal)是团队最有价值的资源，她是一位从大学直接招募的出色分析师，能够比任何人更快地拼凑出大局。这些一流特工顽强地调查恐怖主义、有组织犯罪和反情报等案件。[11]
从第二季开始，曾在一家金融公司工作了7年的特工斯图尔特·斯科拉(StuartScola)加入团队，并与同时转入外勤工作的克里斯汀(Kristen)搭档。此外，在莫西尔退休后，伊索贝尔·卡斯蒂尔接替了莫西尔担任车队主管。第三季开始时，克里斯汀转移到德克萨斯州达拉斯，并由前纽约警察局警官兼白领部门特工蒂芙尼华莱士接替。
